TECHNICAL COLUMN
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同源重组的基因克隆方法, 相比双酶切载体构建方法,该方法的构建过程有些不同,双酶切构建过程比较繁琐,同源重组构建过程相对简单,可以省去很多的时间和精力,但假阳性率略高。
了解细胞迁移的方式和原因,可以为科学家提供新的方法来指导这些细胞,或者在需要的时候关闭或减缓运动。新颖的细胞追踪技术--M-TRAIL,细胞的运动模式
运用Image J和Graphpad软件对Western Blot条带灰度分析,详解详细步骤快来看看!
组蛋白有四种类型:H2A、H2B、H3、H4,组蛋白是染色体基本结构蛋白,因富含碱性氨基酸 Arg 和 Lys 而呈碱性,可与酸性的 DNA 紧密结合。因为组蛋白是偏碱性的,因此我们可以使用酸法
在收集到生物材料之后,最好能即刻进行 RNA 制备工作。若需暂时储存,
则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备 RNA 时,将储
存于冷冻柜的材料取出
1.30%丙烯酰胺溶液
【配制方法】将 29g 丙烯酰胺和 1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为 60ml的水中。加热至 37℃溶解之,补加水至终体积为 100ml。用滤器(0.45μm 孔径)过滤除菌,查证该溶液的 pH 值应不大于 7.0,置棕色瓶中保存于室温。
1 蛋白质序列的检索
1.1 从 NCBI 检索蛋白质序列
//www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Protein
一般来说,利用质谱数据鉴定蛋白质主要有两种方法:肽质量指纹图谱(PMF)和肽序列标签分析(sequence tag analysis)。这两种方法较传统的 N 端测序或内部 Edman 测序法敏感数百倍,其检测低限为飞摩尔(fmol)水平(如银染的 2D胶点或 1D 胶带)。
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